1.1.4对大肠杆菌的检测:大肠杆菌对啤酒厂来说是最严重的污染元素,因此,日常检测非常重要。下面,就是我公司的检测步骤:
1.1.4.1设备和材料
温箱:36±1℃;水浴:44±0.5℃;天平;显微镜;均质器或乳体;温度计;平皿;试管;吸管;载玻片。
1.1.4.2培养基及乳体
乳糖胆盐发酵管;伊红美蓝发酵管;乳糖发酵管;蛋白胨水;革兰氏染色液;靛基质试剂。
1.1.4.3大肠菌群检验程序(表1)
1.1.4.4操作步骤
(1)检样稀释
①以无菌操作将检样25mL(或25g)放于含有225mL灭菌生理盐水,或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠),或灭菌乳钵内,经充分震荡或研磨,做成1∶10的均匀稀释液。②用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,注入含有9mL生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1∶100的稀释液。
③另取1mL灭菌吸管,按上项操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管。
④根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择3个稀释度,每个稀释度接种3管。
(2)乳糖发酵实验
将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管;1mL及以下者,用单料乳糖发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃温箱内,培养24±2h,如果所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。
(3)分离培养
将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃温箱内,培养18h—24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实实验。
(4)证实实验
在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1个—2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36±1℃温箱内,培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气,革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌,即可报告为大肠菌群阴性。
(5)报告
根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的最可能数。
1.2加强微生物检测操作人员的培训
(1)强化微生物检测人员的无菌意识;
(2)提高微生物检测人员的操作技能;
(3)微生物检测人员一定要注意个人卫生;
(4)个人物品不准随便放于无菌室内;